Молекулярно-генетическая диагностика тромботической тромбоцитопенической пурпуры (ген ADAMTS13) – диагностика наследственной формы ТТП (код 7845)

Описание услуги:

• Молекулярно-генетическая диагностика тромботической тромбоцитопенической пурпуры (ген ADAMTS13). Целенаправленное генетическое исследование методом секвенирования ключевых экзонов (5, 6, 20, 24, 29) гена ADAMTS13, кодирующего специфическую металлопротеиназу.
• Фермент ADAMTS13 играет критическую роль в регуляции системы гемостаза. Его физиологическая функция - протеолитическое расщепление (нарезка) ультрабольших мультимеров фактора фон Виллебранда (VWF) на фрагменты нормального размера. Это предотвращает спонтанную агрегацию тромбоцитов под действием VWF и образование микротромбов в мелких сосудах.
• Генетический дефект, приводящий к дефициту или функциональной несостоятельности фермента ADAMTS13, вызывает наследственную форму тромботической тромбоцитопенической пурпуры (синдром Апшоу–Шульмана). При этом ультрабольшие мультимеры VWF не расщепляются, что приводит к их накоплению, патологической активации тромбоцитов, образованию множественных микротромбов, гемолитической анемии с фрагментацией эритроцитов и потребления тромбоцитов.
• Ген ADAMTS13 расположен на хромосоме 9. Наследственная форма ТТП (синдром Апшоу-Шульмана) наследуется по аутосомно-рецессивному типу. Для развития клинических проявлений заболевания пациент должен быть гомозиготным по патогенной мутации или компаунд-гетерозиготным (носить две разные мутации в разных аллелях гена).
• Патогенные мутации в гене ADAMTS13, чаще всего расположенные в критических функциональных доменах, кодируемых исследуемыми экзонами, приводят к синтезу дефектного фермента. Это проявляется либо полным отсутствием его активности (тип I), либо наличием дисфункционального белка с остаточной активностью (тип II).
• Тест используется для подтверждения диагноза наследственной (врожденной) формы ТТП, что принципиально важно для дифференциальной диагностики с иммунной (приобретенной) формой заболевания. Установление молекулярно-генетической причины позволяет подтвердить пожизненный характер болезни, определить прогноз, обосновать необходимость плазмотерапии и/или специфического лечения, а также провести генетическое консультирование семьи.
• Наследственная форма ТТП является крайне редким заболеванием с частотой около 4-6 случаев на 1 миллион человек. Она составляет лишь небольшую часть всех случаев ТТП, большинство из которых имеют аутоиммунную природу. Однако своевременная диагностика и лечение жизненно необходимы, так как без терапии летальность при ТТП достигает 95%.
• Клиническая манифестация наследственной ТТП может быть спровоцирована состояниями, которые увеличивают нагрузку на систему VWF или повышают уровень стресса: инфекционные заболевания, беременность, хирургические вмешательства, воспалительные процессы. Часто первый эпизод возникает в детском или молодом возрасте.

Показания к назначению:

• Подтверждение диагноза наследственной тромботической тромбоцитопенической пурпуры (синдрома Апшоу-Шульмана) у пациентов с типичной клинической картиной (микроангиопатическая гемолитическая анемия, тромбоцитопения, неврологические симптомы, лихорадка, почечная недостаточность) при выявлении критически низкой активности фермента ADAMTS13 (< 10%) и отсутствии ингибирующих антител.
• Дифференциальная диагностика между наследственной и иммунной (аутоантительной) формами ТТП для выбора правильной долгосрочной тактики ведения пациента (плановые трансфузии плазмы при наследственной форме vs. иммуносупрессия при приобретенной).

Подготовка к анализу:

• Специальной подготовки не требуется. Нарушение правил подготовки может повлиять на результат исследования.

Биоматериал:

• Венозная кровь (с ЭДТА).

Срок выполнения:

• До 17 рабочих дней (срок не включает день взятия биоматериала).

Референсные значения:

• Патогенных и условно патогенных вариантов в указанных экзонах гена ADAMTS13 не обнаружено (качественный тест).

Интерпретация результатов:

• Обнаружение двух патогенных мутаций в гомозиготном состоянии или в состоянии компаунд-гетерозиготности (в транс-положении на разных хромосомах) является молекулярно-генетическим подтверждением диагноза наследственной формы ТТП (синдрома Апшоу-Шульмана).
• Обнаружение единственной гетерозиготной мутации при наличии клинических и лабораторных признаков ТТП не позволяет однозначно поставить диагноз наследственной формы, но значительно повышает ее вероятность. Вторая мутация может находиться в неисследованных участках гена (регуляторных областях, интронах, других экзонах) или быть крупной делецией, не выявляемой методом секвенирования. Носительство одной мутации может быть связано со сниженной активностью фермента и умеренно повышенным риском тромбозов.
• Отсутствие патогенных вариантов в проанализированных экзонах значительно снижает вероятность наследственной формы ТТП, но не исключает ее полностью, так как мутации могут находиться в других частях гена ADAMTS13. В этом случае наиболее вероятными являются иммунная форма ТТП (с наличием антител к ADAMTS13) или другие причины тромботической микроангиопатии (аутоиммунные заболевания, инфекции, онкология, лекарственные препараты).

Заключение

Молекулярно-генетическая диагностика, направленная на анализ ключевых экзонов гена ADAMTS13, является важнейшим инструментом для подтверждения диагноза наследственной тромботической тромбоцитопенической пурпуры. Положительный результат позволяет установить пожизненную причину тяжелого, угрожающего жизни состояния, что имеет решающее значение для выбора адекватной и своевременной терапии (плазматерапия), проведения генетического консультирования семьи и оценки прогноза. Интерпретация результатов должна проводиться исключительно врачом-гематологом в контексте данных клинической картины и обязательного определения функциональной активности фермента ADAMTS13 и наличия антител к нему.